X-Gal

X-Gal也称5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactopyranoside或5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactoside，X-Gal是β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的显色底物，在β-半乳糖苷酶的催化下会产生蓝色产物。常用于β-半乳糖苷酶的原位染色检测以及蓝白斑筛选。

分子式为C14H15BrClNO6，分子量为408.63，CAS Number 7240-90-6。 

X–Gal是β–半乳糖苷酶（β–galactosidase）的底物，水解后呈蓝色。基于这个特点，pUC系列载体DNA（或其他带有lacZ 基因载体DNA）以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体载体DNA进行转染时，如果在平板培养基中加入X–Gal和IPTG，由于β–半乳糖苷酶的α–互补性，可以根据是否呈现白色菌落（或噬菌斑）而方便地挑选出基因重组体。 

使用方法 ： 

首先把X-Gal配制成20 mg/ml的二甲基甲酰胺（DMF）溶液（-20℃避光保存），然后在100 ml的琼脂培养基中，加入200 μl的上述溶液、100 μl的IPTG（24 mg/ml）和100 μl的Amp（100 mg/ml），制作成X-Gal、IPTG、Amp平板培养基。当DNA片段插入*pUC系列载体（或其他带有lacZ、Amp基因载体），然后转化*lacZ缺失细胞中后，涂布上述的X–Gal、IPTG、Amp平板培养基，可根据长出菌体的蓝白色，而方便地挑选出基因重组体（白色为具有DNA插入片段的基因重组体）。 

注意事项 ： 

◆ 培养噬菌体时，Top agar中的添加量为：50 μl/3 ml（20mg/ml）。 

◆ 含有X-Gal的培养基4℃避光保存，须在1~2周内使用。

IPTG 

诱导原理 

作用

中文品名: 异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷 

商品名称: Isopropyl β-D-1-Thiogalactopyranoside 

英文简称: IPTG 

产品别名: Isopropyl β-D-Thiogalactoside 

通用CAS : 367-93-1 

产品纯度: Sigma ≥99%, Merck ≥98% ，INALCO≥99% 

产品性状: 白色或白色粉末,溶于水后呈清亮无色液体 

分 子 式: C9H18O5S 

分 子 量: 238.30 

保存温度: 2-8°C冷藏保存 ,配制好后保存于-20°C，室温可放置一个月 

主要作用：异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是一种作用极强的诱导剂,不被细*代谢而十分稳定,因此被实验室广泛应用 

IPTG是β–半乳糖苷酶的活性诱导物质。基于这个特性，当pUC系列的载体DNA（或其他带有lacZ 基因载体DNA）以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体的载体DNA进行转染时，如果在平板培养基中加入X–Gal和IPTG，由于β–半乳糖苷酶的α–互补性，可以根据是否呈现白色菌落（或噬菌斑）而方便地挑选出基因重组体。此外，它还可以作为具有lac或tac等启动子的表达载体的表达诱导物使用。